我希望那些学习成绩暂时领先的同学,不断开阔视野,横向比较,高瞻远瞩,我们还有更多的空间,千万不能沾沾自喜,骄傲自满,我们
SDS-PAGE电泳的总耗时主要分为样品处理、电泳分离和染色三个阶段,具体时间如下:
将蛋白质样品与SDS上样缓冲液混合后加热变性,通常需要 5-10分钟
。此过程通过高温使蛋白质变性并充分结合SDS,形成负电荷带。电泳分离(浓缩胶+分离胶)
- 浓缩胶阶段: 在80V电压下持续约20分钟,使蛋白质充分聚集成条带。 - 分离胶阶段
- 考马斯亮蓝染色:
电泳后浸泡1小时,条带逐渐显现。 - 若使用超快速染液(如15分钟显色),可缩短至 15分钟,但需注意后续脱色处理。 染色总耗时约 30分钟至1小时。
总结:标准SDS-PAGE实验全程(含处理、分离、染色)通常需要 2-3小时,若使用快速染液可缩短至1.5小时。实际时间可能因设备、凝胶浓度及操作细节略有差异。